Την επόμενη ημέρα, ελέγχεται η γονιμοποίηση, η οποία θα έχει επιτευχθεί εφόσον παρατηρηθούν, στο μικροσκόπιο 2 προπυρήνια (2 στρογγυλοί σχηματισμοί) εντός των ωαρίων.
Εάν υπάρχει έντονο πρόβλημα με τον αριθμό ή την κινητικότητα του σπέρματος, τότε υπάρχουν ειδικές τεχνικές για να επιτευχθεί η γονιμοποίηση. Παλαιότερα χρησιμοποιούσαμε την τεχνική της μικροσταγόνας, μετά το 1994 χρησιμοποιείται ευρέως η μικρογονιμοποίηση των ωαρίων ή ενδοκυτταροπλασματική έγχυση σπερματοζωαρίου ή ICSI.